禽病/生物技术研究室
依托农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室,广东省畜禽疫病防治研究重点实验室开展科研工作,由廖明教授领衔,围绕畜禽疫病开展诊断试剂和疫苗研制。团队现有固定工作人员23人,其中高级职称10人,博士13人。
主要从事重要动物疫病新型分子诊断试剂和生物制品研发,涵盖禽坦布苏病毒、鹅星状病毒及猪病毒性腹泻相关病原的致病机制研究。搭建HRM分型检测技术和POCT快速检测技术平台,开发适合于临床实时检测病原的方法及精准分型检测方法;搭建细胞悬浮培养工艺技术平台,研发防控猪病毒性腹泻、禽腺病毒等重要动物疫病疫苗产品;聚焦影响家禽产业的鹅星状病毒、坦布苏病毒和生猪产业的猪病毒性腹泻疾病,探究致病原与宿主互作机制。
先后承担国家重点研发计划、国家自然科学基金、国际科技合作专项、农业公益性行业专项,以及省科技厅、省农业农村厅、市科技局等的各类科研项目100余项,获省科技进步奖、省农业技术推广奖等8项,授权国家发明专利36件,获农业农村部新兽药临床试验批件6个。
新型诊断检测技术研发平台
围绕动物疫病鉴别诊断和现场检测两大技术难点,搭建了重要动物病原检测平台,先后建立了鸭鹅细小病毒、坦布苏病毒、鹅星状病毒、鸭鹅呼肠孤病毒、禽腺病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病毒、猪乙型脑炎病毒、布鲁氏杆菌病等多种重要动物疫病基因分型及POCT检测方法,以及动物常见病原快速检测体系。先后发现鹅新型呼肠孤病毒、禽腺病毒2型、鸭腺病毒4型、鸭星状病毒5型、猪新型轮状病毒等多种新发疫病。
瞄准国家动物疫病防控和净化技术需求,凝练了“鸭坦布苏病毒病综合防控技术”、“禽支原体病绿色防控技术”、“猪重要疫病净化控制新技术”和“猪流行性腹泻综合防控关键技术”,并且连续多年入选广东省农业宝马11222这个网站,以广东省家禽产业园和生猪产业园建设为纽带,深入参与省级动物疫病净化及无疫小区建设,推动广东省畜禽养殖业高质量发展。
兽用生物制品研发应用平台
聚焦畜禽养殖业发展技术需求,与国内外疫苗研发企业合作,开展细胞悬浮培养技术工艺、CHO细胞真核表达体系、免疫增强剂组合、致弱重组病毒及活 载体疫苗表达体系等新型疫苗研发技术攻关,研制“鸭坦布苏病毒病灭活疫苗(JM株)”、“鸭传染性浆膜炎活疫苗(1型GD12株)”、“鸡新城疫、禽流感(H9亚型)、禽腺病毒病(I群4型)、鸡滑液支原体四联灭活疫苗(D-VII株+HuN20株+SD15株+HLJ株)”、“禽腺病毒(I群4型)卵黄抗体”、“猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻、猪δ冠状病毒病三联灭活疫苗(SD14株+HuN16株+HeN17株)”、“猪伪狂犬病灭活疫苗(WuC-∆gE/gI株)”获得农业农村部临床试验批件,其中“鸭坦布苏病毒病灭活疫苗(JM株)”和“猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻、猪δ冠状病毒病三联灭活疫苗(SD14株+HuN16株+HeN17株)”正在注册,“鸡新城疫、禽流感(H9)、禽腺病毒(I群,4型)三联灭活疫苗(LaSota株+HS株+DN株)”正在复核。
长期与勃林格殷格翰动物保健(中国)有限公司开展猪繁殖与呼吸综合征疫苗的异源毒株攻毒保护效果评价工作,为生猪养殖业临床疫苗选择提供参考;与天津瑞普生物技术股份有限公司、齐鲁动物保健品股份有限公司、哈药集团生物疫苗有限公司、乾元浩生物股份有限公司等国内知名生物技术企业联合开展家禽技术服务,为家禽养殖业提供生物制品临床效果评估、疫病精准诊断和防控方案制定。
病原与宿主互作机制研究平台
(一)阐明PEDV与宿主细胞相互作用的机制
1.运用比较蛋白质组学鉴定了PEDV增殖中发挥关键作用的宿主因子,分析了PEDV感染的差异蛋白,筛选了PEDV感染所需的关键受体,获得了PEDV感染中发挥重要作用的宿主蛋白。
2.基于非靶向代谢组学分析PEDV对宿主细胞的代谢调控机制,解析了PEDV感染细胞的差异代谢成分和代谢网络,找到了在PEDV天然免疫中发挥作用的代谢通路,筛选到了一种促进PEDV增殖的代谢产物。
3.建立了猪全基因组GeCKO文库,筛选了PEDV感染中关键的宿主因子,获得了稳定表达Cas9的IPEDC-J2细胞系,筛选了促进/抑制PEDV增殖的宿主因子。
4.阐明了IFN-λ3通过TLR7/9和MyD88激活JAK-STAT通路,活化干扰素刺激反应元件,促进PKR、OAS1和ISG15等表达发挥抗PEDV的作用机制。
5.创建了猪的细胞系改造平台,通过RNA干扰技术、CRISPR基因敲除技术和受体表达技术,培育3株有效增殖PEDV的细胞株,为研发新型疫苗提供了支撑。
6.开发具有抗PEDV活性的中药提取物或化合物,筛选PEDV增殖赖以生存的信号通路的抑制剂(中药提取物),负向调控PEDV感染所需代谢通路的代谢产物(化合物),发现了抗PEDV的代谢衍生物和中药提取物,作为疫苗防控PED的有效辅助手段。
(二)阐明坦布苏病毒、鹅星状病毒与宿主细胞相互作用的机制
1.建立坦布苏病毒反向遗传操作平台和疫苗研制平台,证实E和NS蛋白与宿主因子TBK1互作从而影响病毒复制,明确E蛋白是影响TMUV在鸡体内复制能力的关键病毒蛋白。证实鸭驱动蛋白KIF2A能够促进病毒复制,而Viperin蛋白抑制病毒复制。
2.建立雏鹅“痛风”发病模型,阐明波形蛋白与鹅星状病毒VP70蛋白及其RNA相互作用促进病毒复制,证实鹅星状病毒通过抑制过氧化氢酶基因的表达来抑制宿主的氧化还原反应;激活Toll样受体2途径以增强免疫炎症反应;激活乳酸合成中的关键酶以产生抑制宿主抗病毒反应的乳酸积累,从而促进病毒自身的复制。